近年來(lái)，
熒光-PCR法技術(shù)有了重大改進(jìn)。將傳統PCR檢測模式中的PCR擴增和檢測相結合（即在同一個(gè)密閉容器中將PCR擴增反應與熒光標記探針檢測結合在一起）檢測目的核酸的檢驗方法紛紛出臺。這樣的檢測方法稱(chēng)為“實(shí)時(shí)”PCR，表示PCR擴增產(chǎn)物可被實(shí)時(shí)檢測。準確地說(shuō)，“實(shí)時(shí)”是指在每一個(gè)PCR循環(huán)后檢測擴增產(chǎn)物，當PCR擴增反應結束后，我們可得到每個(gè)樣品的PCR擴增產(chǎn)物變化曲線(xiàn)。通過(guò)分析這些反應曲線(xiàn)，不但可得到病原體的定性檢測結果，還可對病原體的數量進(jìn)行精確定量。
實(shí)時(shí)熒光-PCR法不僅具有普通PCR的高靈敏性，而且由于應用了熒光探針，可通過(guò)光電傳導系統直接探測PCR擴增過(guò)程中熒光信號的變化以獲得定量結果，所以還具有DNA雜交的高特異性和光譜技術(shù)的高準確性，克服了常規PCR的許多缺點(diǎn)。
熒光-PCR法相比較普通PCR模式的優(yōu)勢：
1.由于實(shí)時(shí)熒光PCR采用封閉的檢測模式，因此擴增產(chǎn)物導致污染的可能性比普通PCR要小得多。
2.由于擴增產(chǎn)物的檢測在PCR擴增過(guò)程中同時(shí)進(jìn)行，并且數據的采集、分析全部由儀器自動(dòng)完成，因此整個(gè)檢測所需的時(shí)間比普通PCR要節省許多。
3.實(shí)時(shí)熒光PCR檢測模式功能強大，具備定性、定量、突變、多項目等檢測功能。而普通PCR要完成上述項目需采用不同的技術(shù)平臺。
4.實(shí)時(shí)熒光PCR進(jìn)行定量檢測時(shí)，其定量線(xiàn)性范圍（5-6 logs）比普通PCR（2-3 logs）要寬得多。
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更新時(shí)間：2023-01-05
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