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抗凝裂解大牛血保存的注意事項以下幾點(diǎn):
(1)需要長(cháng)期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月.由于血清結冰時(shí)體積會(huì )增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jì)隽?
(2)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現沉淀.
(3)熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過(guò)程中須規則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會(huì )造成血清沉淀物顯著(zhù)增多,而且還會(huì )影響血清的質(zhì)量.補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化.
(4)血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì )影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點(diǎn)":經(jīng)過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉淀物的形成會(huì )顯著(zhù)增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀(guān)察象"小黑點(diǎn)",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì )影響細胞生長(cháng),但如果懷疑血清質(zhì)量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清.
(5)一般廠(chǎng)商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌.如發(fā)現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清.
阪崎腸桿菌顯色培養基
結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA)
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(MLST)
萬(wàn)古霉素(改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯凍干配套試劑)
腦—心浸萃液態(tài)培養基
TSA胰蛋白胨大豆瓊脂培養基(大豆消化酪素瓊脂培養基)
緩沖蛋白胨水(緩沖胨水增菌液) (BPW)
結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA)
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白月示肉湯(MLST)
腸道菌增菌肉湯(E E)
阪崎腸桿菌顯色培養基
結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA)
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(MLST)
馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂
馬鈴薯葡萄糖水
GVC增菌液
馬鈴薯葡萄糖瓊脂(椰毒假單胞)
水解酪蛋白胨(MH)瓊脂
水解酪蛋白胨(MH)肉湯
氨芐青霉素麥康凱配套試劑
氨芐青霉素麥康凱瓊脂基礎
脫脂奶蔗糖胰蛋白胨瓊脂
蔗糖胰蛋白胨肉湯
AHM鑒別培養基