大鼠ELISA試劑盒用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用。
大鼠ELISA試劑盒試驗時制備試劑與收集血樣:
1.收集標本
血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。正常標本測定前用標本稀釋液作1:10稀釋。
2.標準品液配制
使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成10ng/ml的溶液。設標準管8管,1管加標本稀釋液900ul,2-8管加入標本稀釋液500ul。在1管中加入10ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至2管。如此反復作對倍稀釋,從第7管中吸出500ul棄去。第2管為空白對照。
3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。
4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)。
相關檢測程序:
1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘;
2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干;
3.每孔中加入第一抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘;
4.洗板:同前;
5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘;
6.洗板:同前;
7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘;
8.每孔加入100ul終止液混勻;
9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。