柯薩奇病毒型變種PCR檢測試劑盒規格

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注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時(shí)間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

實(shí)驗過(guò)程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿(mǎn)意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?，從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照)，每個(gè)測試反應體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?，分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
小鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶（P-JNK）elisa試劑盒Anti-TSARG6(DNAJB13) Antibody研究領(lǐng)域  神經(jīng)生物學(xué)

小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β（MIP-1β/CCL4）elisa試劑盒Anti-TRPV5 Antibody研究領(lǐng)域  免疫學(xué)

小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1β（SDF-1β/CXCL12）elisa試劑盒Anti-TSC1 Antibody研究領(lǐng)域  免疫學(xué)

小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α（sm Actinin-α）elisa試劑盒Anti-TSC2 Antibody(原貨號PB0181)研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 干細胞 細胞表面分子 糖蛋白 細胞類(lèi)型標志物 b-淋巴細胞

小鼠大動(dòng)脈平滑肌肌動(dòng)蛋白α2（Acta2/Actsa/Actvs）elisa試劑盒Anti-TSC2 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 免疫學(xué)

小鼠T細胞白血病同源盒蛋白1（Tlx1/Hox11/Tlx-1）elisa試劑盒Anti-TSG101 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 結合蛋白

兔過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α（PPARA）elisa試劑盒Anti-TSG101 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 細胞生物 信號轉導 新陳代謝

人核因子κB抑制物激酶β（IKK-β）elisa試劑盒Anti-TSLP Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學(xué) 細胞分化 細胞骨架

人胱硫醚β-合酶（CBS）elisa試劑盒Anti-TSLP Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 細胞周期蛋白 細胞分化 表觀(guān)遺傳學(xué)

人玻連蛋白（VTN）elisa試劑盒Anti-TSPAN12 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學(xué)

人表皮生長(cháng)因子受體（EGFR）elisa試劑盒Anti-TSHR Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學(xué) 信號轉導

人G蛋白偶合受體44（GPR44/CRTH2/DL1R）elisa試劑盒Anti-TSHR Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 細胞凋亡

人FOS 樣抗原2（FOSL2）elisa試劑盒Anti-TTK Antibody研究領(lǐng)域  心血管 信號轉導 激酶和磷酸酶 糖尿病

人6酮前列腺素（6-K-PG）elisa試劑盒Anti-TTR Antibody(原貨號PB0715)研究領(lǐng)域  細胞生物 免疫學(xué) 細胞膜受體 自然殺傷細胞 t-淋巴細胞

犬甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）elisa檢測試劑盒Anti-TTR Antibody(原貨號PB0782)研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 信號轉導 干細胞 細胞類(lèi)型標志物 自然殺傷細胞 淋巴細胞 t-淋巴細胞 b-淋巴細胞

O-(2,4,6-三磺?；?乙酰羥肟酸乙酯  1,2-環(huán)己烷二二肟  9-甲基

3--1,3,4,5-四氫-2H-1-苯并氮雜卓-2-  1,4-苯醌二肟  橙花素

3--4-甲基  丁二肟  2-基

3-基-5-溴-2-甲氧基  二苯甲肟  DL-泛醇

NA  10X分子篩

MOLECULAR SIEVES  3A分子篩  308080-99-1

DIATOMACEOUS EARTH  硅藻土  91053-39-3

Bentonite  皂土  1302-78-9

大鼠游離*狀腺原酸(Free-T3)ELISA試劑盒 ，英文名： Free-T3 ELISA Kit

人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA檢測試劑盒HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 96T/48T

大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(sIL-1RⅡ)免疫試劑盒 Rat soluble ierleukin-1 receptor Ⅱ,sIL-1RⅡ ELISA kit

CLIAKitfodT(Humaerminaldeoxynucleotidylansferase)ELISAKit人末端脫氧核苷酸轉移酶規格：48T/96T

人體HemoglobinERFLP基因分析試劑盒20次

ELISAKitai-HAV人抗甲型肝炎病毒IgG抗體規格：48T/96T
柯薩奇病毒型變種PCR檢測試劑盒規格Chloroacetonitrile,99%通用試劑　25G

1,3-Dicyabenzene,98%通用試劑　25G

Suberonitrile,98%通用試劑　25ML

Tetrafluoroterephthalonitrile,99%通用試劑　1G

Anthranilonitrile,98%通用試劑　25G

3-Amipropionitrile,98%通用試劑　5ML

2-Thiopheneacetonitrile,97%通用試劑　25G

4-Hydroxybenzonitrile,95%通用試劑　25G

4-(Trifluoromethyl)benzonitrile,99%通用試劑　5G

3,4,5-Trimethoxyphenylacetonitrile,97%通用試劑　5G

Diphenylacetonitrile,98%通用試劑　100G

2,6-Dichlorobenzonitrile,97%通用試劑　25G

4-Amibenzyl cyanide,99%通用試劑　5G

4-Amibenzonitrile,98%通用試劑　5G

4-Ami-2-(trifluoromethyl)benzonitril...通用試劑　250MG