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比氏腸微孢蟲(chóng)PCR檢測試劑盒價(jià)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:APT檢測試劑盒 石斛堿Dendrobine2115-91-5水飛薊賓Silibinin22888-70-6
產(chǎn)品分類(lèi)
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 比氏腸微孢蟲(chóng)PCR檢測試劑盒價(jià)格 |
英文名稱(chēng) | Enterocytozoon bieneusi PCR |
貨號 | LZP6701 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
人雌激素受體β(ESR2)elisa試劑盒Anti-DGKB Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 生長(cháng)因子和激素
人β葡萄糖苷酶(β-glucosidase)elisa試劑盒Anti-DGKZ Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子
人Coll2-1 elisa試劑盒Anti-DHPS Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 信號轉導 激酶和磷酸酶 腫瘤細胞生物標志物
犬β內啡肽(β-EP)elisa試劑盒Anti-DHPS Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué) 信號轉導 細胞類(lèi)型標志物 新陳代謝 線(xiàn)粒體
馬黃體生成素(LH)elisa試劑盒Anti-DGKK Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 干細胞
雞白介素4(IL-4)elisa試劑盒Anti-DHRS11 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物
大鼠活化素A(ACV-A)elisa試劑盒Anti-DHRS4 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 免疫學(xué) 信號轉導
大鼠丙二酸單酰輔酶A脫羧酶(MLYCD)elisa試劑盒Anti-DHX8 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 免疫學(xué)
大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)elisa試劑盒Anti-DHX8 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 信號轉導 新陳代謝
大鼠apelin 13(AP13)elisa試劑盒Anti-DIABLO Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子
猴子白介素8(IL-8/CXCL8)elisa試劑盒Anti-DIAPH2 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導
猴腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒Anti-DIRAS1 Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué)
猴前蛋白轉化酶枯草溶菌素9(PCSK9)elisa試劑盒Anti-DLC1 Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué)
鹿胰島素樣生長(cháng)因子結合蛋白3(IGFBP-3)elisa試劑盒Anti-DIO3 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 細胞膜受體
狗微管相關(guān)蛋白tau(MAPT)elisa試劑盒Anti-DKC1 Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 激酶和磷酸酶 新陳代謝
二鄰羥苯基大乙酸鐵鈉 2-甲氧基-3-甲基吡嗪 4-
7-基吲哚啉 硫代丁酸甲酯 異辛酸鈉
2,4,5-三苯磺酰 二糠基二硫 異
卡維地洛 2-甲氧基-3-異丁基吡嗪 N-乙氧羰基鄰苯
7664-41-7
NA 質(zhì)氮氧化物(劑)標樣
NA 質(zhì)凱氏氮標樣
NA 質(zhì)陰離子表面活性劑標樣
大鼠脂蛋白脂肪酶(LPL)ELISA試劑盒 ,英文名: LPL ELISA Kit
人甲狀腺抗體(TAb)ELISA檢測試劑盒HumahyroidAibody,TAbELISAKit 96T/48T
大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒 Rat leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit
CLIAKitfoIEG1ELISAKit大鼠TGF-β誘導早期基因1規格:48T/96T
全組織衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒10次
ELISAKitEHF人抗流行性出血熱病毒抗體IgM規格:48T/96T
比氏腸微孢蟲(chóng)PCR檢測試劑盒價(jià)格小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Mouse Glycated hemoglobin A1c,A1c ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠糖皮質(zhì)類(lèi)固醇受體(GR)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Mouse glucocorticoid receptor,GR ELISA Kit進(jìn)口/原裝
小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Mouse glycogen synthase kinase,GSK ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Mouse Glycogen phosphorylase BB,GP-BB ELISA Kit*
小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Mouse Glycogen phosphorylase II,GP-II ELISA Kit進(jìn)口/原裝
小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Mouse Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit*
小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Mouse ferritin,FE ELISA Kit*
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。