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島青霉PCR檢測試劑盒價(jià)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:HMGCS1檢測試劑盒用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度
產(chǎn)品分類(lèi)
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 島青霉PCR檢測試劑盒價(jià)格 |
英文名稱(chēng) | Penicillium islandicumPCR |
貨號 | LZP7125 |
實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
BCIP, 2Na辛酸乙酯 ≥99%, FCC, FG噻吩-2-羧酸 99%
BCIP丁酸乙酯 GCS,≥99.5% (GC) 2-噻吩乙酰氯 98%
INT Substrate solution丁酸乙酯 99%3-噻吩甲 98%
Alcian Blue 8GX丁酸乙酯 ≥99%, FCC富勒烯C70 99%
Fluorescamine丁酸乙酯 分析標準品富勒烯C70 98%
Brilliant cresyl bulue酸乙酯 GCS,≥99.5% (GC) 富勒烯C60 99.9%
Brilliant green酸乙酯 CP,98%富勒烯C70 99%
Light green SF yellowish酸乙酯 AR,99%富勒烯C60 99.9%
Naphthol green B酸乙酯 分析標準品,≥99.7% (GC)黃色氧化鉛 99.999% metals basis
Fast green FCF酸乙酯 ≥98%, FCC, FG2-氨基-3,4-二甲酸 98%
Bromocresol green乙酯 GCS,≥99.5% (GC)反式-(1R,2R)-2-氨基環(huán)戊鹽酸鹽 97%
Bromocresol green sodium salt乙酯 99%反式-(1S,2S)-2-氨基環(huán)戊鹽酸鹽 98%
Methyl Red mixed indicator solution乙酯 ≥99%, FCC順式-(1R,2S)-2-氨基環(huán)戊鹽酸鹽 98%
Methyl Red mixed indicator powder己酸乙酯 Standard for GC,>99%(GC)3-氨基巴豆酸甲酯 97%
Methylene green己酸乙酯 CP,98.0%(S)-3-氨基-1,2- 98%
Methyl Green己酸乙酯 99%3-氨基-2-己內酰胺 97%
鹽酸班布特羅DNA-PKcs (3H6) Mouse mAbREF-1/APEX1 多功能DNA修復酶抗體
鹽酸乙胺丁KIFC1 AntibodyREEP5 受體表達蛋白5/息肉相關(guān)蛋白抗體
鹽酸乙胺?。藴势罚?/font>Phospho-Scribble (Ser1220) (D8A2) Rabbit mAbRED/CSA2 軟骨肉瘤相關(guān)蛋白2抗體
鹽酸芐絲肼c-Myb (D2R4Y) Rabbit mAbRECQL5 RecQ解旋酶樣蛋白5抗體
卡格列凈;坎格列凈PathScan® Phospho-Ret (panTyr) Chemiluminescent Sandwich ELISA KitRECQL5 RecQ解旋酶樣蛋白5抗體
苯駢三氮唑(BTA,1,2,3-苯駢三氮唑)Pumilio 1 AntibodyrecPEP 重組豬乙腦病毒結構蛋白抗體
鹽酸倍他司汀Pumilio 2 AntibodyRECK 金屬蛋白酶抑制因子RECK抗體
鹽酸倍他司?。藴势罚?/font>SignalSilence® p27 Kip1 siRNA IREC8 減數分裂重組蛋白家族REC8抗體
甲磺酸倍他司汀CDCP1 (D8M5K) Rabbit mAbRDH13 視黃脫氫酶13抗體
胰島素(豬)SunitinibRDH11 視黃脫氫酶11抗體(型肝炎病毒核心蛋白)
島青霉PCR檢測試劑盒價(jià)格人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:5克
人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT50毫克
人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT500克
人酪氨酸羥化酶(TH)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT25克
人雷帕素靶蛋白(mTOR)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT500克
人類(lèi)白細胞抗原A(HLA-A)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT25克
人類(lèi)白細胞抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1克
人類(lèi)白細胞抗原C(HLA-C)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:5克