Product Center
小孢子酒曲菌PCR檢測試劑盒價(jià)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:RV IgM檢測試劑盒樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。
產(chǎn)品分類(lèi)
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
RELATED ARTICLES組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
?
產(chǎn)品名稱(chēng) | 小孢子酒曲菌PCR檢測試劑盒價(jià)格 |
英文名稱(chēng) | Rhizopus microspousPCR |
貨號 | LZP7229 |
實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
Cordyceps polysaccharide硫代乙酸 CP,85.0%對酚 AR
Ginkgo biloba3,5,5-*基己酸 97%對酚 分析標準品, ≥99.5% (HPLC)
EDOT叔丁 HPLC,>99.5%(GC)對酚標準溶液 1000μg/ml,溶劑:甲
2-Amiphel-4-sulfonic acid叔丁 GR,≥99.5% (GC)對酚標準溶液1.00mg/ml,基體:甲
PTC三乙二 99%對酚標準溶液1009mg/L,溶劑:甲
Sodium hydrosulfide hydrate* AR,98.5%()對酚 >99.0% (GC)
Calcium propionate磺胺胍 98%黃芪甲苷 分析標準品,≥98%
PMMA磺胺嘧啶鈉鹽 98%高良姜素 98%
Triflic acid磺胺 AR,99.8%高良姜素 分析標準品,≥99%
Tributyl Citrate磺胺 GCS,>99.8%(HPLC)京尼平 98%
Acetyl tributyl citrate磺胺 分析標準品京尼平甙 分析標準品,≥98%
Disodium phenyl phosphate hydrate鄰苯二甲酸二烯酯 CP叔丁基二甲基氯硅烷 97%
AcridoneD-2-苯甘氨酸 99%叔丁基二甲基氯硅烷溶液 50%甲苯溶液
TCHL?(+)-α-苯甘氨酸 98%N,O-雙(*基硅烷基)三氟 96%
PCAD3,5-二甲基-4-吡唑 97%N,O-雙(*基硅烷基)三 for GC, ≥99.0% (GC)
TOA4-羥基-3-甲酸 98%N,O-雙(*基硅烷基)三氟 99% BSTFA + 1% TMCS
磷酸伯安喹;磷酸伯氨喹TAB3 (D5J7D) Rabbit mAbPLCZ1 磷酸肌磷脂酶PLCZ1抗體
D-熒光素,蟲(chóng)熒光素FANCB (D9W6S) Rabbit mAbPLCG 2/PLC gamma 2 磷酯酶Cγ2抗體
麻保沙星;馬波沙星PLCbeta3 (D9D6S) Rabbit mAbPLCG 1/PLC gamma 1 磷酯酶Cγ1抗體
MK0677,伊布莫侖甲磺酸鹽SignalSilence® Tyk2 siRNA IPLC β2/Phospholipase C beta 2 磷酯酶Cβ2抗體
瓊脂粉VinblastinePLC β1/Phospholipase C beta 1 磷酯酶Cβ1抗體
三氟胸苷;三氟尿苷(TFT) GABARAPL2 (D1W9T) Rabbit mAbPLC beta 3 磷酯酶Cβ3抗體
四合輔羧酶;四合硫胺焦磷酸酯FoxO1 (C29H4) Rabbit mAb (PE Conjugate)PLB/phospholamban 心臟磷蛋白抗體
甲磺酸加替沙星SignalSilence® Rheb siRNA IPLAUR/CD87 尿激酶型纖溶酶原激活因子受體抗體
鹽酸哌羅匹隆Histone H3 (1B1B2) Mouse mAbPLAU/UPA/Urokinase 尿激酶型纖溶酶原激活因子抗體
替拉扎明SimpleChIP® Human CD11b Promoter PrimersPLASTIN3/T Plastin 絲束蛋白T Plastin抗體
小孢子酒曲菌PCR檢測試劑盒價(jià)格兔補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:5克
兔超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25克
兔兒茶(CA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:保存:-20℃250毫克
兔鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1克
兔骨保護素(OPG)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25克
兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:50毫克
兔骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:1公斤
兔過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT10克