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豬皰疹病毒型PCR檢測試劑盒價(jià)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:加樣時(shí)樣品量誤差,對于陰或很陽(yáng)的標本影響不大,但對閾值附近的標本影響極大,EJ/GlyRS檢測試劑盒 建議校對加樣器。
產(chǎn)品分類(lèi)
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 豬皰疹病毒型PCR檢測試劑盒價(jià)格 |
英文名稱(chēng) | Suid Herpesvirus1( SuHV1) I PCR |
貨號 | LZP7357 |
實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
Gambogic acid茜素紅 Indicator松節油 AR
Gambogin茜素黃R AR松節油 藥用級
Gaudichaudic acid茜素黃R Indicator硫酸鋅,七 AR,99.5%
Glochicoccin D茜素黃R 98%氫氧化 電子級, 99.99% metals basis,鈉除外
Glucosamine sulfate十二烷基磺酸鈉 CP,97.0%氫氧化標準溶液 0.1000mol/L(0.1N)
Glycerine trioleate十二烷基磺酸鈉 AR,98.0%氫氧化 電子級,50%溶液
Goitrin十二烷基磺酸鈉 離子對色譜氫氧化 AR,90%
Griffonilide十二烷基苯磺酸鈉 AR,90.0% 氫氧化 ACS
Heptanal oxime十二烷基苯磺酸鈉 CP氫氧化 GR,95%
Heterophyllin B十二烷基苯磺酸鈉 95%氫氧化 電子級,99.999% metals basis,鈉除外
Homobaldrinal十二烷基苯磺酸鈉 98%正戊 Standard for GC,>99.5%(GC)
Homovanillic Acid Sulfate紅 分析標準品,>99%(HPLC)正戊 98%
Humic acid sodium salt紅 85%2,4-二枯基酚 97%
Humulone紅 96%苯甲酸 PT,99.95%-100.5% (alkalimetric)
Indirubin紅 99%苯甲酸 ACS, 99.5%
Indoxacarb莧菜紅 85%1-氯丁烷 for HPLC, ≥99.5%
1,3-二甲基-5-吡唑酮Keratin 5 (D4U8Q) Rabbit mAbphospho-ASK1 (Ser966) 磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體
氟啶胺(標準品)Phospho-Stat1 (Tyr701) (D4A7) Rabbit mAb (PE Conjugate)phospho-ASAP1/DDEF1(Tyr782) 磷酸化發(fā)育分化增強因子1抗體
氟節胺(標準品)Phospho-IRS-1 (Ser332/336) Antibodyphospho-Arhgef2(Ser810) 磷酸化Rho鳥(niǎo)苷酸交換因子2抗體
氯吡脲(標準品)Phospho-PP1α (Thr320) Antibodyphospho-arfaptin 2(Ser260) 磷酸化ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體
氯氟吡氧乙酸(標準品)SPAR (D9P9T) Rabbit mAbphospho-AQP2(Ser269) 磷酸化通道蛋白2抗體
麥穗寧(標準品)PP1α Antibodyphospho-AQP2(Ser264/261) 磷酸化通道蛋白2抗體
標準溶液(100μg/m,u=6~2%,酮)GLI2 (R770) Antibodyphospho-AQP2(Ser264) 磷酸化通道蛋白2抗體
氟戊菊酯標準溶液(1.00mg/ml,基體:甲)IGFBP3 (D1U9C) Rabbit mAbphospho-AQP2(Ser261) 磷酸化通道蛋白2抗體
雙氟磺草胺(標準品)PCNA (PC10) Mouse mAbphospho-APS(Ser598) 磷酸化APS抗體
增甘膦(標準品)PCNA (PC10) Mouse mAbphospho-APP/ABPP(Tyr757) 磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體
豬皰疹病毒型PCR檢測試劑盒價(jià)格Trichlorosilane,≥99.0%多肽試劑 25G
Ethoxytrimethylsilane,≥98.0%多肽試劑 25ML
N-(Triethoxysilylpropyl)urea多肽試劑 40.0 - 50.0 %溶液-100ML
Triethoxysilane,≥97.0%多肽試劑 25ML
Triethoxyphenylsilane , ≥98.0 %多肽試劑 50ML
Triethoxy(octyl)silane,≥97.0%多肽試劑 100ML
Triisopropylsilane ,≥99.0%多肽試劑 25ML
Trimethoxy(octyl)silane,≥96.0%多肽試劑 5ML
Allyltrimethylsilane,≥98.0%多肽試劑 5ML
Trimethoxysilane,≥95%多肽試劑 100ML
Trimethoxy(propyl)silane,≥97.0%多肽試劑 100ML
Trimethoxyphenylsilane, ≥95.0 %多肽試劑 25ML
Allyl(chloromethyl)dimethylsilane , ≥...免疫試劑 1G
Trimethylsilyl azide多肽試劑 5ML
2-(Trimethylsilyl)ethal, ≥98.0%多肽試劑 1ML