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白水河病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:保存條件:2-8℃產(chǎn)品性狀:液體盒裝產(chǎn)品價(jià)格:含稅含運費,我們全程提供HP-CagA-IgG檢測試劑盒實(shí)驗技術(shù)指導和CLIA試劑盒免費代測。
產(chǎn)品分類(lèi)
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 白水河病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格 |
英文名稱(chēng) | Whitewater Arroyo virus(WWAV)RTPCR |
貨號 | LZP7469 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
Chromeazurol SFmoc-L-beta-高谷氨酸 6-叔丁酯 98%2,2-二甲基琥珀酸 98%
Cibacron Blue F3G-AFmoc-L-beta-高異亮氨酸 98%4-羥基-3-甲酸 98%
Cresol RedFmoc-O-芐基-L-4-羥基脯氨酸 98%2-甲基琥珀酸 99%
Cresol Red sodium saltFmoc-4-叔丁氧基-L-脯氨酸 98%N-芐基甘氨酸乙酯 97%
Gram′s IodineFmoc-4-氨基-L-苯氨酸 98%苯基丁二酸 98%
LitmusN-(9-芴甲氧羰?;?-D-3-氯苯氨酸 98%DL-α-氨基 98%
D-LuciferinN-芴甲氧羰基-L-4-氯苯氨酸 98%對甲 99%
D-Luciferin sodium saltFMOC-D-4-氯苯氨酸 98%硫代楊酸 99%
Mass silver stainL-4-氟苯氨酸鹽酸鹽 97%2-甲氧基乙氧基氯 95%
1-Nitroso-2-naphthol4-氟-D-苯氨酸鹽酸鹽 99%正己烷 for HPLC, ≥98.0% (GC)
PANFMOC-L-4-氟苯氨酸 98%正庚烷 Standard for GC,>99.5%(GC)
PARZ-4-Fluoro-Phe-OH 98%正庚烷 農殘級, ≥99%(GC)
PAR sodium saltFmoc-D-4-苯氨酸 96%正庚烷 AR,98%
Acid blue 1Fmoc-對硝基-L-苯氨酸 98%正庚烷 CP,96%
Semixylel OrangeFmoc-D-4-氨酸 98%正庚烷 for HPLC, ≥98%(GC)
Sodium 2-naphthalenesulfonateFmoc-3-硝基-L-酪氨酸 98%正庚烷 分析標準品,≥99.8% (GC)
草酸鈉容量分析用溶液標準物質(zhì)(0.05M)IKKε (D61F9) XP® Rabbit mAbMOSP/PTPMT1 線(xiàn)粒體蛋白酪氨酸磷酸酶1抗體
氫氧化鈉容量分析用標準溶液(0.0997mol/L)IKKε (D61F9) XP® Rabbit mAbMOS 原癌基因絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MOS抗體
剛果紅(分析標準品,≥97.0%(HPLC))CTCF (D1A7) XP® Rabbit mAbMorphine(C1F3) 單克隆抗體
正癸酸(分析標準品,≥99.5%(GC))Topoisomerase IIα (D10G9) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)Morphine(2F11) 單克隆抗體
異丁酸(分析標準品,>99.5%(GC))CTCF (D31H2) XP® Rabbit mAbMorphine 抗體
甲基反亞油酸甲酯(分析標準品)CTCF (D31H2) XP® Rabbit mAbMorphine 抗體
肉豆蔻酸甲酯(分析標準品,≥99.5%(GC))Streptavidin (Sepharose® Bead Conjugate)Moacylglycerol Lipase 單酰甘油脂肪酶抗體
三聚胺(分析標準品,≥99.9%(HPLC))Mouse IgG (Sepharose® Bead Conjugate)MOG 髓鞘少樹(shù)突膠質(zhì)細胞糖蛋白抗體
棕櫚酸甲酯(分析標準品,≥99.0%(GC))CT2 (D8Z8P) Rabbit mAbMoesin 膜突蛋白抗體
亞麻酸甲酯(標準品)Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Sepharose® Bead Conjugate)MOBP 少突膠質(zhì)細胞髓鞘相關(guān)蛋白抗體
白水河病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格氯離子通道蛋白2抗體3,9-Dihydroxypterocarpan中文名:別名:Demethylmedicarpin分子式:C15H12O4
細胞角蛋白8抗體Martyside中文名:地黃苷別名:分子式:C31H40O15
c-mer原癌基因酪氨酸激酶抗體Atraric acid中文名:別名:分子式:C10H12O4
前列腺素氧化環(huán)化酶1抗體Mollugin中文名:大葉茜草素別名:Rubimaillin分子式:C17H16O4
Ⅰ型膠原抗體Furomollugin中文名:別名:分子式:C14H10O4
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。