Product Center
二氫洋川芎內酯C別名:分子式:C12H14O3磷酸化GATA結合蛋白3抗體Glyceryl hexacosaate中文名:別名:分子式:C29H58O4谷氨酰胺6-磷酸果糖轉移酶抗體
產(chǎn)品分類(lèi)
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
RELATED ARTICLES組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
?
產(chǎn)品名稱(chēng) | 幽門(mén)螺旋桿菌PCR檢測試劑盒價(jià)格 |
規格 | 50T |
貨號 | LZP7865 |
實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
氧化標準溶液(100μg/ml,u=6~5%,基體:酮)GFP (D5.1) XP® Rabbit mAb硝酸鐠,五水合物
(分析標準品,99%)SimpleChIP® ChIP-seq Multiplex Oligos for Illumina® (Single Index Primers)硝酸鈥
除草標準溶液(10μg/ml,u=5%)Erlin-1 Antibody環(huán)己-1-甲
2-萘氧酸(標準品)Erlin-2 AntibodyN,O-1,二?;胚?/span>
滅菌丹標準溶液(100μg/ml,u=2%)Death Receptor Antibody Sampler Kit II-甲基吡啶
滅菌丹標準溶液(10μg/ml,u=6%)MUC16 Antibody氨基-硝基吡啶
標準溶液(100μg/ml,u=4%)Caspase-3 (8G10) Rabbit mAb (HRP Conjuga)3,二氟酸
惡草酮(分析標準品,97.5%)EGF Receptor (T43) Antibody(1S,4R)-氨基環(huán)戊-2-甲酸
甲基嘧啶(10μg/ml,u=3%)Akt2 (5B5) Rabbit mAb6-吡啶-2-
撲滅津(標準品)Phospho-Akt (Thr308) (C31E5E) Rabbit mAb1-溴-2-氟-三氟甲氧基
戊炔草(標準品)Phospho-Akt (Thr308) (C31E5E) Rabbit mAb3,5-二溴-羥基
五甲(標準品)Akt (5G3) Mouse mAb鉑酸銨
基對氧(標準品)Akt (5G3) Mouse mAb六鈀酸
腐霉利(標準品)Akt1 (2H10) Mouse mAb鉑酸
吡蚜酮(標準品)Akt1 (2H10) Mouse mAb吡啶-酸
敵稗(分析標準品,98%)Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr1135/1136)/Insulin Receptor β (Tyr1150/1151) (19H7) Rabbit mAb (Biotinylad)吡啶-酸
水硫標準溶液(10μg/ml,u=5~3%,酮)Phospho-mTOR (Ser2448) Antibody六氟銻酸鈉
水硫標準溶液(100μg/ml,u=5~3%,酮)Phospho-mTOR (Ser2448) AntibodyN'-CBZ-D-鳥(niǎo)氨酸
綿羊催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr389) 酸化核糖體S6蛋白激酶β2100 ul
綿羊雌二(E2)ELISA試劑盒Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr229) 酸化核糖體S6蛋白激酶β2100 ul
綿羊成纖維細胞生長(cháng)因子23(FGF23)ELISA試劑盒Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424) 酸化核糖體S6蛋白激酶β220 ul
綿羊補體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒phospho-P70 S6 Kinase beta (Ser371) 酸化核糖體S6蛋白激酶100 ul
綿羊補體片段3a(C3a)ELISA試劑盒p90RSK 絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白100 ul
綿羊白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒Phospho-p90RSK (Ser380) 酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白20 ul
綿羊白介素6(IL-6)ELISA試劑盒Phospho-p90RSK (Thr359/Ser363) 酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白100 ul
綿羊白介素4(IL-4)ELISA試劑盒Phospho-p90RSK (Thr573) 酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白100 ul
綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒VIP receptor II 腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體-II/血管活性腸肽受體-II100 ul
幽門(mén)螺旋桿菌PCR檢測試劑盒價(jià)格磷酸化膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體Senkyulide R中文名:別名:分子式:C12H16O5
自主生長(cháng)因子GFI1抗體Senkyulide E中文名:別名:分子式:C12H12O3
延伸因子G2抗體Dihydrosenkyulide C中文名:二氫洋川芎內酯C別名:分子式:C12H14O3
磷酸化GATA結合蛋白3抗體Glyceryl hexacosaate中文名:別名:分子式:C29H58O4
谷氨酰胺6-磷酸果糖轉移酶抗體Digalactosyldiacylglycerol中文名:雙半乳糖二酰甘油別名:DGDG分子式:C49H88O15