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產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 貨號 |
丙酮酸激酶(PK)活性測定試劑盒 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) | LZ-S64551 |
儀器:
1、分光光度計/酶標儀/(比色測定波長(cháng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:血清(漿)可直接測定。紅細胞:需按照試劑盒中說(shuō)明書(shū)上紅細胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。=
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗方法學(xué)》以及試劑盒中詳細說(shuō)明書(shū)。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時(shí)間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗臺上,以便 不時(shí)觀(guān)察,待對照管顯色適當時(shí),即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應步驟,但卻 是決定實(shí)驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結合的物質(zhì)以及在反應過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線(xiàn)粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
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胃蛋白酶原C(PGC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)小單孢菌屬菌種枯草芽胞桿菌人α淀粉酶(AMS/AMY)ELISA試劑盒,
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感,避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。