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ANG血管抑素/血管穩定蛋白ELISA試劑盒公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品:TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1) jia狀腺核轉錄因子-1抗原規格: 0.5mg*Tubulin- Gamma 微管蛋白-γ抗原規格: 0.5mg*TWIST protein peptide TWIST蛋白抗原規格: 0.5mg*T Beta peptide
產(chǎn)品分類(lèi)
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
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1.標本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻進(jìn)行,提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | ANG血管抑素/血管穩定蛋白ELISA試劑盒 |
英文名稱(chēng) | ANG ELISA Kit |
產(chǎn)品規格 | 48T/96T |
產(chǎn)品貨號 | LZ-E028847 |
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時(shí),用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長(cháng)時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作步驟:
1.標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?,用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。
大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)試劑盒過(guò)硫銨溶液(AP,10%)1,2-(EDB) 99%0.95
大鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒TEMED1,4-二溴丁烷 98% 分析標準品,95%
大鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒TEMED1,5-二溴戊烷 98%黃豆原 分析標準品,≥98%
大鼠單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)試劑盒溴酚藍水溶液(1%)1,6-二溴己烷 97%黃豆原 98%
大鼠單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)試劑盒溴酚藍水溶液(2%)間二溴苯 97% 分析標準品,≥95%
大鼠單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)試劑盒磷鹽-SDS電泳緩沖液(4×)溴代異戊烷 96% 95%
大鼠單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)試劑盒CL蛋白抑制劑混合液(1mg/ml)溴乙酯 97%鬼臼素 98%
大鼠巨噬集落激因子(M-CSF)試劑盒苯磺酰氟溶液(PMSF,100mmol/L)溴烷 >99.0%(GC)鬼臼素 分析標準品,>98%
大鼠巨噬集落激因子(M-CSF)試劑盒苯磺酰氟溶液(PMSF,100mmol/L)三溴 AR,98% ≥99.0% (HPLC)
大鼠巨噬來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒苯磺酰氟溶液(PMSF,100mmol/L)香柏油 FMP(顯微鏡用)東莨菪氫鹽 98%
大鼠巨噬來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒蛋白抑制劑混合液(100×PIC)代十六烷 97%粉防己 分析標準品,≥98%
大鼠巨噬炎性蛋白2(MIP-2)試劑盒乙酰(10mg/ml)烯酰, 96%,含~0.05% 噻吩穩定劑維D3 98%
大鼠巨噬炎性蛋白2(MIP-2)試劑盒焦亞硫鈉溶液(100×)2-氨-6-吡啶 98%維D3 分析標準品
大鼠巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)試劑盒亮抑肽溶液(lepueptin,1mg/ml)乙烯酯 99%二茂鐵 99%
大鼠巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)試劑盒胰蛋白抑制劑溶液(1mg/ml)2-氨-5-吡啶 99%草二酯 CP,98%
大鼠質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1)試劑盒 抑肽溶液(Aprotinin,2mg/ml)溴烯, 包含≤1000 ppm 氧化烯穩定劑, 98%草二酯 GR,99%
ANG血管抑素/血管穩定蛋白ELISA試劑盒用途:
乳脫氫酶染色
注意事項:
主要由四氮唑藍孵育液、陰性對照組成。染色后酶活性部位呈藍紫色沉淀。
儲存條件:4℃,避光,6個(gè)月