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產(chǎn)品名稱(chēng):NADPMENADP蘋(píng)果酸酶測試盒微量法
產(chǎn)品規格:100管/96樣
檢測方法:微量法
產(chǎn)品貨號:LZ-01357S
產(chǎn)品分類(lèi):輔酶Ⅱ系列
商品介紹:
測定意義 ME廣泛存在于微生物、培養細胞、動(dòng)物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋(píng)果酸氧化脫羧的可逆反應,產(chǎn)生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應,是蘋(píng)果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來(lái)植物ME活性測定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據輔酶專(zhuān)一性和對底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。 測定原理: NADP-ME催化NADP+還原成NADPH,在340nm下測定NADPH增加速率。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。 |
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機物和有機物在紫外可見(jiàn)區都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應學(xué)科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò )合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當的顯色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿(mǎn)意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內,如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速。
c-fos 檢測試劑盒槐果草鍶 5N,99.999%三聚硫 95%
c-fos 檢測試劑盒槐角苷四硫磺鈉,二水 98%偏硅鈉,五水 95%
c-myc癌因產(chǎn)物(c-myc)檢測試劑盒還原型硫-5-羥色肌酐 98%零水偏硅鈉 SiO2, 44-47%
c-myc癌因產(chǎn)物(c-myc)檢測試劑盒環(huán)巴(-)-鹽東莨菪 ≥99.0% 偏硅鈉,九水 AR
Smad1 檢測試劑盒 環(huán)黃芪(-)-鹽東莨菪 分析標準品,99.0% 鈦四丁酯 CP,98.0%
Smad1 檢測試劑盒 環(huán)氧前胡糖精鈉 分析標準品鈦四丁酯 ≥99.0% (GC)
Smad7 檢測試劑盒 環(huán)氧續隨子環(huán)草隆 分析標準品薯蕷皂素 90%
Smad7 檢測試劑盒 環(huán)氧澤瀉烯2,4,5-涕 分析標準品橙皮素 分析標準品, ≥98%
腫瘤相關(guān)抗原(TAA)檢測試劑盒 黃柏乙鈉,無(wú)水 電泳級, ≥99%橙皮素 97%
腫瘤相關(guān)抗原(TAA)檢測試劑盒 黃柏十二烷硫鈉 分子生物學(xué)級,≥98.5% (GC)番茄紅素 分析標準品,≥95%
TGF-β誘導早期因1(TIEG1)檢測試劑盒 黃豆黃苷十二烷硫鈉 離子對色譜級,≥99.0% (GC)胡椒 分析標準品,>98%
TGF-β誘導早期因1(TIEG1)檢測試劑盒 黃豆黃素化釤(III),六水 99%槲皮苷 分析標準品,≥98%
腫瘤血管生長(cháng)因子(TAF)檢測試劑盒 黃獨素B氟化銀(I) 99%白藜蘆 分析標準品
腫瘤血管生長(cháng)因子(TAF)檢測試劑盒 黃腐酚四丁酚 試劑級迷迭香 分析標準品,≥97%
角蛋白20(CK-20)檢測試劑盒 黃花敗醬甙C噻苯隆 分析標準品2,6-二-4-三氟 98%
角蛋白20(CK-20)檢測試劑盒 黃決明素噻苯隆 用于植物培養2,6-二-4-氨 98%
NADPMENADP蘋(píng)果酸酶測試盒微量法Alexa Fluor 647標記的羊抗豚鼠IgGHuman, Mouse, Rat
PE-Cy5.5標記的羊抗豚鼠IgG巴卡丁 IIIHuman, Mouse, Rat
PE-Cy7標記的羊抗豚鼠IgG白藜蘆Human, Mouse
羅丹明標記的羊抗豚鼠IgGHuman, Mouse
FITC標記的羊抗豚鼠IgG蓓薩羅丁;貝沙羅汀Human, Mouse
膠體金標記的羊抗豚鼠IgG苯丁氮芥Human, Mouse, Rat
性磷酶(AP)標記的羊抗豚鼠IgG苯酰十字孢(PKC-412)Human, Mouse, Rat
性磷酶(AP)標記的羊抗兔IgG比卡魯Human, Mouse
FITC標記的羊抗兔IgG吡非尼,哌非尼Human, Mouse, Rat
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。