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光素標記2,4-二氧酸IgG100 ul駱駝轉化生長(cháng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒4E-BP1/EIF4EBP1/FITC 熒光素標記4E結合蛋白1IgG20 ul駱駝脂蛋白脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒4EBP1(phospho Ser64) /FITC 熒光素標記酸化4E結合蛋白1IgG100 ul
產(chǎn)品分類(lèi)
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 牛副結核分歧桿菌(MPB)核酸試劑盒價(jià)格 |
規格 | 48T |
貨號 | LZP8005 |
實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
OXOID胰蛋白胨TWEAK Receptor/Fn14 AntibodyR-1-BOC-2-氨甲基哌啶
β-萘黃酮Phospho-EGF Receptor (Tyr1148) Antibody-基吡啶
舒隆LCN2 (D4M8L) Rabbit mAb反式-(-)-2-氨基環(huán)戊鹽酸鹽
舒隆(標準品)TBP (D5C9H) XP® Rabbit mAb2-溴酰
L-抗壞血酸-2-酸三鈉鹽;Vc酸酯鈉TBP (D5C9H) XP® Rabbit mAb二基二甲氧基硅烷
IBMX, 異丁基-1-甲基EGF Receptor (15F8) Rabbit mAb鉑(0)-1,二-1,1,3,四甲基二硅氧烷
鹽酸普魯卡因BNIP3 (D7U1T) Rabbit mAb1-甲基-1-亞
鹽酸普魯卡因(標準品)Phospho-Jak2 (Tyr1007) (D15E2) Rabbit mAb2-溴-2'-酮
伏立諾他雜質(zhì)Phospho-Jak2 (Tyr1007) (D15E2) Rabbit mAb9-菲酸
當藥苷(標準品)Phospho-EGF Receptor (Tyr1173) (53A5) Rabbit mAb溴代二酸二酯
皂素(進(jìn)分)Phospho-EGF Receptor (Tyr1173) (53A5) Rabbit mAb2--氨基吡
苦豆Anti-mouse IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjuga) 6-基-2-吡
松柏Anti-mouse IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 555 Conjuga) 炔鋰二絡(luò )合物
酰輔酶A鈉鹽Anti-mouse IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 647 Conjuga) 2,二酸
甘氨膽酸Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjuga) 甲氧基-甲酸
甘氨膽酸(標準品)Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 555 Conjuga)酸三丁酯
肌苷酸二鈉DNMT3B (E9X7R) Rabbit mAb (Mouse Specific)6-羥基嘌呤
環(huán)索奈德Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 647 Conjuga) 1-溴-2-氟-三氟甲氧基
倉鼠E選擇素(SELE)ELISA試劑盒14-3-3 ζ(phospho Ser58)/FITC 熒光素標記酸化14-3-3 ζIgG20 ul
駱駝ELISA試劑盒2,4-D/FITC 熒光素標記2,4-二氧酸IgG100 ul
駱駝轉化生長(cháng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒4E-BP1/EIF4EBP1/FITC 熒光素標記4E結合蛋白1IgG20 ul
駱駝脂蛋白脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒4EBP1(phospho Ser64) /FITC 熒光素標記酸化4E結合蛋白1IgG100 ul
駱駝天門(mén)冬氨酸氨基轉移酶(AST)ELISA試劑盒4EBP1(phospho Thr37/46) /FITC 熒光素標記酸化4E結合蛋白1IgG300 ul
駱駝過(guò)氧化氫酶ELISA試劑盒phospho-4EBP1 (Ser65/Thr70)/FITC 熒光素標記酸化eIF4E結合蛋白IgG100 ul
駱駝谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)ELISA試劑盒14-3-3/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記14-3-3IgG100 ul
駱駝氨酸氨基轉移酶(ALT)ELISA試劑盒5-HT/FITC 熒光素標記5-羥色IgG300 ul
駱駝β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒5-HT/RBITC 紅色羅丹明標記5-羥色IgG100 ul
牛副結核分歧桿菌(MPB)核酸試劑盒價(jià)格磷酸化鈣/鈣調素依賴(lài)蛋白激酶CAMK2B/D/G抗體3'-O-Methylmurraol中文名:別名:分子式:C16H18O4
腫瘤易感候選基因3抗體Kimcuongin中文名:別名:分子式:C20H20O6
磷酸化腫瘤易感候選基因3抗體Luvangetin中文名:魯望桔內酯別名:分子式:C15H14O4
神經(jīng)元電壓門(mén)控鈣通道γ3/L-type Ca++CP γ3抗體Glycyrol中文名:甘草酚別名:分子式:C21H18O6
3號染色體開(kāi)放閱讀框25抗體4-Methylumbelliferone中文名:4-甲基傘形酮別名:7-Hydroxy-4-methylcoumarin分子式:C10H8O3